乙酰(Acetyl-CoA)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 25管/24样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
乙酰广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路 氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于ATP合成。此外,乙酰是合成脂肪酸,酮体,及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
测定原理:
苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰和草酰乙酸生成柠檬酸和。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰含量的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1支,-20℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:液体10μL×1支,4℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加入22.5mL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:液体30mL×1瓶,4℃保存。
工作液的配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.92 m L),将试剂二、三和四按照1:1:90的比例混合,或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀(可以测定24样);加样前置37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴锅中预热30 min;现配现用;
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