测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/24样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。测定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：30mL×1瓶， 4℃保存；
试剂一：液体15 mL×1瓶， 4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入10μL试剂五和1.3 mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
试剂三：液体15 mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体50 mL×1瓶，4℃保存；
试剂五：液体100μL×1支，4℃保存；
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