(Pepsin)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/48S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别,也会引起分泌的减少。
测定原理:
可催化血红蛋白水解,水解产物与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与活性呈正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
测定步骤:
1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到580 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。
3. 标准管:取微量玻璃比色皿/96孔板,加入20μL标准品,40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,于580 nm测光吸收,记为A标准管。
4. 空白管:取微量玻璃比色皿/96孔板,加入20μL蒸馏水,40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,于 580 nm测光吸收,记为A标准空白管。
5. 对照管:取 EP管,加入100 μL蒸馏水,置于37℃水浴保温10min;加入100μL试剂四,盖紧后摇匀1min;加入20μL粗酶液,混匀后8000g 4℃离心10分钟取上清;在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL,再加入40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,于580 nm测光吸收,记为A空白管。
6. 测定管:取 EP管,加入20μL粗酶液,100μL试剂三,置于37℃水浴保温10min;加入100μL试剂四,
盖紧后摇匀1min;8000g 4℃离心10分钟取上清;在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL,再加入40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,于 580 nm测光吸收,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需要测定一次。
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