过氧化物酶(GPX)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/96S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
GPX是氧化还原循环中催化还原型(GPX)氧化的主要酶之一。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型与ROS反应,生成氧化型GSSG,从而保护生物膜免受ROS的损害,维持细胞的正常功能;拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体等能力。
测定原理:
GPX催化有机过氧化物氧化GSH,产生GSSG;还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GPX,同时NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、酶标仪、96孔板、和蒸馏水。
粗酶液提取:
1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。
2. 按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3.血清等液体:直接测定。
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