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固相萃取装置使用方法

2023年05月27日 12:46:34      来源:上海欧戈电子有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:15

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     介绍了固相萃取装置系统的主要功能,包括自动化系统。

     通常,开始的液体混合物中充满所谓的吸附剂,形成一个固定相。选择萃取柱填料的类型是分离过程的关键。从流动相提取的分析物将以不同于液体的方式与固定相相互作用。换句话说,分析物对色谱柱中的填充物具有很强的亲和力,因此在流动相的其余部分流过色谱柱时,仍留在色谱柱中。然后对分析物进行洗脱,以获得更高纯度的样品。固定相可以在流动相中保留杂质,使目标化合物流过并在洗脱液中收集。

     固相萃取(SPE)是一种液相色谱法,用于从溶解或悬浮的液体混合物中分离特定的化合物或分析物。通常,目标分析物与混合物中的其他杂质分离,以便使用所得样品进行进一步分析或定量研究,例如质谱分析。它能去除干扰蛋白质,但不能去除磷脂,后者干扰下游质谱分析。固相萃取(SPE)可以同时去除这两种杂质,使得质谱分析样品中相对没有干扰杂质。
     固相萃取装置是一种需要无限优化的方法。为了搞好并继续实验,有助于了解固相萃取的基本成分,从而更容易地设定萃取条件,提高工作效率。

     固相吸附剂和流动相溶剂的类型在很大程度上取决于样品或目标分析物的性质。极性和电荷的主要特征分析物是极性。非极性或阳离子或阴离子决定了合适的固定相。将其与适当的疏水性溶剂结合取决于待分析物是通过还是留在柱中以获得试剂组。
     溶剂强度有助于确定填料在固定相流动分析中的速度。对于较弱的溶剂,通过固定相的过程会较慢,因为分析物与包装材料的关系会更长,而对于较强的溶剂,过程通常更快,这会破坏分析物与固定相之间的相互作用。

固相萃取常见的几种类型   

    1、正相和反相固相萃取装置

    固相萃取仪有多种类型,其中最重要的是正相和反相。正相固相萃取使用极性固定相和非极性流动相,通过亲水相互作用介导提取。正相固相萃取通常用于分离不带电荷的分析物,分析物可以是从疏水到极性的任何地方。大多数固定相由二氧化硅组成,二氧化硅已经与特定官能团键合以赋予填料材料所需的特性,例如极性程度或疏水性。

    反相固相萃取仪是相反的,分析物使用极性流动相通过非极性固定相,萃取由疏水相互作用介导。反相固相萃取通常用于极性非极性的分析物。通常用于反相固相萃取固定相的材料包括具有结合的烷基或芳基的二氧化硅,聚合物涂覆的二氧化硅,基于聚合物的材料。

    2 离子交换固相萃取装置

    离子交换固相萃取,提取是通过固相和目标分析物上的带电化学基团之间的静电相互作用来介导的。它通常用于根据电荷分离大蛋白质,氨基酸或核苷酸。蛋白质可以具有各种带正电荷或带负电荷的基团,这是它们从固定相中分离和洗脱的基础。这通过使用用于固定相的离子交换填充材料和具有适于与目标分析物相互作用的离子浓度的流动相来实现。逐渐增加流动相中其他离子的pH或浓度将选择性地洗脱分析物。

    使用的离子交换类型部分取决于分析物和离子交换剂的组成。在其表面上具有硫酸部分的强阳离子交换剂总是用负电荷电离,而带有羧酸基团的较弱阳离子交换剂在较高pH下电离,但在较低pH下电离。相反的情况适用于强和弱阴离子交换剂。

    3 混合模式

    固相萃取的组合方法称为混合模式离子交换色谱,离子交换和反相固相萃取装置。它适用于可能含有中性,酸性和碱性物质的复杂混合物,这些物质可通过疏水相互作用保留在色谱柱上。

 

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