BOD5（五日生化需氧量）的测定

分析方法及标准：

稀释和接种法

仪器：

一般实验室仪器、50ml酸式滴定管、溶解氧瓶、恒温培养箱。

药剂配置：

1、磷酸盐缓冲溶液（盐溶液）：将8.5g磷酸二氢钾，21.8g，33.4g七水合磷酸氢二纳和

1.7g氯化铵溶于水中，稀释至1000mL

2、溶液（盐溶液）：将22.5g七水合溶于水中，稀释至1000mL。

3、氯化钙溶液（盐溶液）：排27.6g天水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。

4、氯化铁溶液（盐溶液）：将0.25g六水合氯化铁溶于水，稀释至1000mL。

5、亚*溶液：将1.575g亚*溶于水中，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需现用现配。

6、丙烯基硫脲硝化抑制剂：溶解0.20g丙稀基硫脲于200mL水中混合，4°C保存，此溶液可稳定保存14天。

7、碱性溶液：称取500g家*溶解于300-400mL水中，另称取150g（或135gNal）溶于200mL水中，待*溶液冷却后，将两溶液合并，混匀，用水稀释至1000mL，如有沉淀，则置过夜后，倾出上清液，贮于棕色瓶中。用像皮塞塞紧，避光保存。

8、无水二价硫酸锰溶液340g／L（或一水硫酸锰380g／L溶液），可用450g/L四水二价溶液代替。过滤不澄清的溶理。

9、溶液：将3.2g五水溶解于新煮沸并冷却的水中，再加0.2g的*（NaOH），并精释至1000m。溶液贮存于深色玻璃瓶中。

10、10％淀粉溶液：称取1g可溶淀粉，用少量水调成期状，再用刚煮沸水冲稀至100ml。冷却后，加入0.1g或0.4g贮藏。

检测步骤：

1、稀释水：在5-20L的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水温在（20±1）℃，用曝气装置至少曝气1h，使稀释水中的溶解氧达到8mg／L以上。使用前每升水中加入四种盐溶液各1.0ml，混匀，20℃保存。在曝气的过程中防止污染，特别是防止带入有机物、金属、氧化物或还原物。稀释水中氧的质量浓度不能过饱和，使用前需开口放置1h，且应在24h内使用。剩余的稀释水应弃去。

2、稀释倍数的确定：根据HJ505-2009中“表BOD5测定的稀释倍数”确定稀释倍数。

3、将稀释后试样充满两个溶解氧瓶中，使试样少量溢出，防止试样中的溶解氧质量浓度改变，使瓶中存在的气泡靠瓶壁排出。将一瓶盖上瓶盖，加上水封，在瓶盖外罩上一个密封罩，防止培养期间水封水蒸发干，在恒温培养箱中培养5d±4h后测定试祥中溶解氧的质量浓度。另一瓶15min后测定试样在培养前溶解氧的质量浓度。同步空白。

4、溶解氧的测定（破量法）：将待测溶解充满溶解氧瓶，加入2ml碱性过硫酸钾和1ml硫酸锰溶液。充分混匀后产生棕色沉淀，加入2ml浓硫酸使沉淀溶解。取样100ml，用滴定至浅黄色，加入1ml淀粉指示剂溶液变蓝，继续用滴定至蓝色刚退去。

检测原理：

在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解量。通常情况下是指水祥充满定全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品清消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。

标准溶液标定：

1．于250ml玻璃瓶中，加入100ml水和1g，加入10.00ml O.0250mol/L重铬酸钾标准溶液，5ml（1＋5）硫酸溶液，密封，摇匀。

2、于暗处静置5min后，用溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1m淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录用量

3、计算

M-溶液浓度，单位：mol/L：

V-滴定时消耗溶液的体积，单位：ml。

非稀释法：

ρ1-水样在培养前的溶解氧浓度，单位：mg／L；

ρ2-水样在培养后的溶解氧浓度，单位：mg／L．

稀释法：

ρ1-接种稀释水样在培养前的溶解氧浓度，单位：mg／L；

ρ2-接种稀释水样在培养后的溶解氧浓度，单位：mg／L；

ρ3-空白在培养前的溶解氧浓度，单位：mg／L；

ρ4-空白在培养后的需解氧浓宜，单位：mg／L；

f1-稀释水在培养液中所占的比别：

f2-原样品在培养液中所占的比例。

技术要求：

1、玻璃器皿洗净，先用洗涤剂浸泡清洗，然后用浸泡，最后依次用自来水，蒸馏水洗净。

2、水样稀释数超过100时，应预定在容量瓶中用水初步稀释后，再取适量进行后稀释培养，耗溶解氧反而较多的现像。

3、如样品中的有机物含量较少，BOD5的质量浓度不大于8mg/L，且样品中有足够的微生物，

用非稀释法测定。

4、著试样中的含有硝化细菌，有可能发生硝化反应， 需在每升试样中加入2ml丙烯基硫脲消化。

5、对在短时间内不能消失的余量，可加入适量亚*溶液去掉样品中存在的余量和氯含量。

安全注意：

1、丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要要求佩戴防护用具，避免接触皮肤和衣 服，标准溶器的配制应在通风橱内进行操作，检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。

2、注意浓硫酸使用操作安全。

3、使用前要检查玻璃仪器是否有破损，不要使用有缺口或裂缝的玻璃器皿。