贴壁细胞原位转染

贴壁细胞的转染是生命科学家们一直以来都比较头疼的问题，尤其是基于电穿孔的原理将外源DNA向贴壁细胞的导入。2011年，上海劲马生物研发出了基于24孔板的原位贴壁转染。即可对培养在24孔板中的细胞在生长周期中的任意阶段进行贴壁转染，无需任何物理或化学消化。这就克服了传统的电穿孔将贴壁细胞悬浮影响其本身的生理状态的障碍。这种转染模式不仅适用于新鲜分离培养中的贴壁细胞，而且对于冻存的贴壁细胞如原代神经元的转染也大有裨益。因为可以在复苏后培养的任意生命阶段进行转染。zui先商品化的为AD1 4D-Nucleofector™ Y kit,适用于原代神经细胞的贴壁转染。如原代神经元、胶质细胞、以及神经干细胞等。根据不同的神经细胞类型，培养条件以及培养时间的不同，转染效率在20%-70%之间。

应用:  24孔板内原代神经元的贴壁转染

转染前，神经细胞培养在标准的24孔培养板内。转染时，弃细胞培养液，加入转染液并将24孔电极板插入24孔培养板。将此三明治结构的板放入4D Y unit进行转染。24个孔可设置24个独立的转染程序

4D Nucleofector—的灵活性

1. 转染细胞数量的灵活性：转染细胞数量在2×10^4-2×10^7个cells/反应

2. 转染通量的灵活性：可1-24之间任意通量；更可升级96 shuttle实现96的高通量

3. 转染耗材的灵活性：既可电转杯，也可电极条板，又可标准24孔板

4. 转染细胞状态的灵活性：既可悬浮细胞，又可贴壁细胞原位转染
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