腺相关病毒AAV

腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）是目前发现结构的、无包膜的单链DNA病毒，病毒基因组长约有4.7Kb，属于细小病毒家族。腺相关病毒（AAV）因其能长期表达、毒性低、免疫原性低、组织特异性高等优势，已成为基因治疗领域最重要的基因载体之一。

北京大学第三眼科的胡双和杨丽萍在2020年发表的文献“不同血清型腺相关病毒载体转染小鼠视网膜后的表达效率”中，以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)作为标记, 观察不同AAV血清型载体介导的视网膜基因表达。实验中，选取视网膜疾病基因治疗中常用的AAV2/2、AAV2/5、AAV2/8和AAV2/9四种血清型AAV载体，并以绿色荧光蛋白作为报告基因，用GFP的表达强度判断AAV载体介导的外源基因在视网膜中的表达效率。实验结果表明，AAV2/8和AAV2/9在小鼠视网膜的GFP绿色荧光明显，说明这两种AAV载体转染小鼠视网膜后的表达效率高，而在这两种血清型中，AAV2/8的GFP绿色荧光主要集中在感光细胞内，AAV2/9在视网膜全层均有表达，说明AAV2/8对视网膜感光细胞特异性更强。详见下图：小鼠视网膜下腔注射不同血清型AAV病毒载体后2周的免疫荧光染色 Expression of GFP reporter gene in different AAV serotype in mouse retina.

观察AAV转染小鼠的GFP荧光

野生型绿色荧光蛋白GFP有两个激发光峰值，分别在395nm（长波紫外线UV-A）和475nm（蓝光）。观察AAV转染小鼠的GFP绿色荧光时，一个经济便携的方式是为现有的体视显微镜增加一个外部激发光，可替代昂贵的荧光显微镜，用于GFP荧光观察。

GFP荧光手电筒GFPfinder-2101RB可搭配支架，适配各种型号的体视显微镜，作为一个外部激发光，用于激发观察AAV转染小鼠的GFP绿色荧光。

下图：适配体视显微镜的GFP荧光手电筒GFPfinder-2101RB

Reference: Hu S, Yang LP. [Expression pattern of different serotypes of adeno-associated viral vectors in mouse retina]. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2020 Oct 18;52(5):845-850. Chinese. doi: 10.19723/j.issn.1671-167X.2020.05.008. PMID: ; PMCID: PMC7653430.