分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律(Lambert-Beer law)：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸光度值A与溶液的浓度C（g/l）或液层厚度L(cm)成正比。其定律表达式A=KCL（K是比例系数）。当C的单位为mol/l时，比例系数用E表示，则A=ECL称为摩尔吸光系数。其单位为L·mol-1·cm-1。它是有色物质在一定波长下的特征常数。
超微量分光光度计的日常维护和保养：
①光源。光源的寿命有限，为了延长光源使用寿命，在不使用仪器时不要开光源灯，应尽量减少开关次数。在短时问的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启。仪器连续使用时间不应超过3h。若需长时间使用，建议间歇30min。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置，不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污沾附。若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
②单色器。单色器是仪器的核心部分，装在密封盒内，不能拆开。选择波长应平衡地转动，不可用力过猛。为防止色散元件受潮生霉，必须定期更换单色器盒干燥剂(硅胶)。若发现干燥剂变色，应立即更换。
③吸收池。必须正确使用吸收池，应特别注意保护吸收池的两个光学面。
④检测器。光电转换元件不能长时间曝光，且应避免强光照射或受潮积尘。
⑤当仪器停止工作时，必须切断电源。
⑥为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作时，应盖上防尘罩。
⑦仪器若暂时不用要定期通电，每次不少于20～30min，以保持整机呈干燥状态，并且维持电子元器件的性能。
超微量分光光度计应用液体的表面张力特性，样品体积只需要0.5~2ul，在检测台上，经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。
