酶联免疫分析仪(通常称为ELISA仪)是一种用于定量测定样本中特定抗原或抗体的仪器，广泛应用于医学、生物学和科研领域。以下是其测定步骤：
1.准备试剂与样本：
-根据实验需求，准备相应的酶标试剂、底物、终止液等。
-收集并处理待测样本，确保样本符合实验要求。
2.设置实验参数：
-打开酶联免疫分析仪，进入操作界面。
-根据实验要求，设置波长、测量模式、反应时间等参数。
3.加样与反应：
-在酶标板上按照实验设计加入样本、标准品及酶标试剂。
-将酶标板放入分析仪中，开始反应过程。
4.测量与读数：
-反应结束后，分析仪会自动测量各孔的光吸收值(OD值)。
-记录或打印测量结果，进行数据分析。
5.清洗与维护：
-反应结束后，取出酶标板，清洗分析仪的测量部件。
-定期对分析仪进行维护和校准，确保其准确性和稳定性。
酶联免疫分析仪的优点：
1.灵敏度高
-能够检测出极浓度的抗原或抗体。这是因为酶标记物的放大作用，一个抗原或抗体分子可以结合多个酶分子，而一个酶分子又可以催化多个底物分子产生大量的有色产物。例如，在检测某些微量的蛋白质激素(如胰岛素)或病毒抗原(如乙肝病毒表面抗原)时，它能够检测出每毫升纳克甚至皮克级别的物质，比一些传统的检测方法(如直接凝集试验)灵敏得多。
2.特异性强
-基于抗原 -抗体反应的特异性，它只对特定的抗原或抗体进行检测。在复杂的生物样本(如血液、尿液等)中，能够准确地识别出目标物质，而不受其他物质的干扰。例如，在检测艾滋病病毒抗体时，即使样本中存在其他多种蛋白质和微生物，它也能准确地检测出抗HIV抗体，为疾病的诊断提供可靠的依据。
3.准确性好
-仪器采用标准化的操作流程和准确的光学检测系统。操作过程中，加样量、反应时间、温度等条件都可以准确控制。而且，通过内部的标准曲线和质量控制体系，可以对检测结果进行校准和验证。例如，在临床检验实验室中，它可以对大量样本进行检测，并且保证每个样本的检测结果都具有较高的准确性，误差范围通常可以控制在较小的范围内，一般相对误差在10以内。
4.可重复性佳
-对于相同的样本，在不同的时间或不同的仪器上进行检测，只要操作条件一致，其结果具有良好的重复性。这是因为它的检测原理和操作流程是相对稳定的。例如，在药物研发过程中，需要对同一批次的生物样本进行多次检测来评估药物效果，酶联免疫分析仪能够保证每次检测的结果基本一致，从而为研究提供可靠的数据支持。
5.检测速度快
-相比一些传统的生物学检测方法(如微生物培养法)，酶联免疫分析仪可以在较短的时间内完成检测。一般来说，整个ELISA试验过程(包括加样、反应、洗涤和检测)可以在几个小时内完成。例如，在急诊检验中，对于怀疑是心肌梗死患者的心肌损伤标志物(如肌钙蛋白)的检测，它可以快速给出结果，为医生的诊断和治疗争取时间。
