上海分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
上海分光光度计对工作环境的要求如下：
①仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5～35℃．相对湿度不超过85％。
②上海分光光度计应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的振动或持续的振动。
③室内照明不宜太强，且应避免直射日光的照射。
④电扇不宜直接向仪器吹风，以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。
⑤尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
⑥供给仪器的电源电压为AC220V±22V，频率为50Hz±1Hz，并必须装有良好的接地线。推荐使用功率为1000w以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。
上海分光光度计典型故障及其排除方法：
1）上海分光光度计不能调零。可能原因：
a）光门不能*关闭。解决方法：修复光门部件，使其*关闭。
b）透过率“99%”旋到底了。解决方法：重新调整“99%”旋钮。 c）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。d）电路故障。解决方法：检修电路。
2）上海分光光度计不能调“99%”。可能原因：
a）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯还亮）。
b）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。
c）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。
d）电路故障。解决方法：调修电路。
3)上海分光光度计测量过程中,“99%”点经常变动。可能原因：
a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。
b）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。
4)上海分光光度计数显不稳。可能原因：
a）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。
b）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。
c）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。
d）光电管、电路等其它原因。
