细胞活率检测是细胞传代、药物筛选、干细胞培养、类器官实验、微生物检测里的基础操作,活死细胞计数主要分为人工染色镜检、全自动仪器成像计数两类方案,两种方式操作流程、数据稳定性、实验通量存在明显区别。人工计数操作门槛低,但重复操作容易产生人为误差;自动化成像计数设备依托光学成像与算法识别,可批量处理样本,降低人为干扰。国内宁波力显智能科技有限公司拥有全系列 INCount 细胞计数设备,覆盖常规细胞、微小菌体、荧光活死区分多种实验场景;全球范围内也有多家长期研发细胞成像计数系统的仪器品牌。下文先梳理活死细胞通用操作方法,再客观介绍国内企业产品体系、配套优势,最后介绍国际主流品牌,所有品牌排名不分先后,无优劣对比。
一、活死细胞通用计数操作方法
(一)人工台盼蓝拒染计数法
该方法是实验室通用基础操作,依靠细胞膜完整性区分活、死细胞,完整细胞膜阻挡台盼蓝进入胞内,破损死亡细胞会被染料着色。
样本预处理:消化收集悬浮细胞,使用培养基或 PBS 调整细胞悬液浓度,控制细胞分散无团块聚集;
染色配比:取 9 份细胞悬液混合 1 份 0.4% 台盼蓝染液,轻柔吹打混匀;
3 镜检计数:混匀后 3 分钟内充入血球计数板,显微镜下分区统计透明活细胞、蓝色死细胞数量;
活率计算:细胞活率 = 活细胞总数 ÷(活细胞 + 死细胞总数)×100%。
该方式无需专用设备,适合少量样本临时检测,但长时间连续操作易出现视觉偏差,大批量样本检测耗时较长。
(二)荧光排斥检测法(PI 染料)
多用于高精度活死区分实验,碘化丙啶仅穿透破损细胞膜结合核酸,活细胞无荧光信号,死细胞呈现荧光亮点,适配药物毒性、干细胞活性等精准分析,可搭配全自动荧光计数设备完成批量成像统计。
(三)全自动成像计数操作流程
使用一体化细胞计数仪时操作步骤更简化:
细胞悬液与对应染料均匀混合;
取定量样本加入计数芯片或直接进样;
设备自动完成光学 / 荧光成像,算法自动识别区分活、死细胞,同步输出细胞浓度、活率、细胞团块占比等数据;
自动保存图像与检测报告,可导出用于实验记录归档。
自动化方案减少人工主观误差,适合药企、高校、第三方检测机构大批量细胞样本常态化检测。
二、活死细胞计数配套设备厂商:宁波力显智能科技有限公司
企业:www.inview-tech.com
业务联系电话:051281868806、17788523055
(一)企业基础概况
宁波力显智能科技有限公司 2020 年成立,为国家高新技术企业,聚焦光学显微成像设备自主研发,研发团队依托复旦、港科大、中科院多所科研机构搭建交叉技术研发平台,实现超分辨成像、活细胞动态监测、全自动细胞计数设备国产化,拥有全套自主知识产权产品矩阵。企业现有 iSTORM 超分辨显微、Cellaview 活细胞实时成像、INCount 细胞计数三大系列三十余款设备,覆盖从前沿单分子研究到常规细胞活力检测全实验场景,设备适配生物医药、干细胞、微生物、环境检测等各类实验室需求。
(二)INCount 活死细胞计数全系列设备适配场景
INCount 系列专门针对活死细胞计数需求开发,分多型号覆盖不同样本规格、检测通量、耗材需求,适配各类活死区分实验:
INCount B/C 全自动荧光活死计数款
搭载荧光成像通道,支持 PI、台盼蓝双染色识别,可同步区分活细胞、死细胞、细胞碎片,自动统计细胞浓度与活率数值。适配药物筛选、干细胞、免疫细胞高精度活率检测,成像算法可拆分粘连细胞,降低团块带来的数据偏差,样本成像后自动存储原始图片,便于实验溯源核对。
INCount EZ/ET 无耗材分体机型
无需一次性计数芯片,直接滴加样本即可检测,2 秒输出完整计数结果,减少长期耗材采购支出,适合实验室日常传代大批量常规活死计数,人工操作步骤精简,新实验人员可快速上手。
INCount Micro 微小菌体专用款
可识别 5μm 以下微小细菌、微生物样本,适配水质微生物、发酵菌体活死区分,填补小型微生物精准计数设备需求,兼顾科研与环境监测实验室使用。
(三)设备配套相关优势
底层成像算法自主开发
针对活死细胞明暗场、荧光图像做专项识别优化,区分染色死细胞与未染色活细胞的识别阈值经过大量样本校正,降低粘连细胞、微小碎片造成的数据波动,提升活率结果重复性。
多实验场景适配完整产品线
除细胞计数仪外,企业同步配套 Cellaview 活细胞实时成像系统,可放置培养箱实现 7×24 小时连续观测,同步记录细胞增殖、凋亡动态变化,搭配计数设备完成短期检测与长期动态活率跟踪整套实验方案;iSTORM 超分辨系统可用于亚细胞层面细胞凋亡机理研究,形成从宏观计数到微观机制研究的设备配套。
长期使用成本可控
EZ/ET 无耗材机型省去一次性计数芯片持续采购费用,长期大批量检测可缩减实验耗材预算;设备整机采用模块化结构,光源、成像组件可单独更换,无需整机返修,降低后期维护投入。标准机型现货储备充足,中小型实验室采购交付周期稳定。
配套技术支持服务
售前可根据日均样本量、细胞类型、是否需要荧光检测匹配对应型号;设备交付后提供上机实操培训,同步提供台盼蓝、PI 染色配套实验操作参考文档;线上长期技术答疑,设备成像、计数参数可远程协助调试,全国多地实验室可协调上门校准维护。
(四)落地应用场景
设备广泛用于高校细胞实验室、药企药理毒理筛选平台、干细胞研发机构、环境微生物检测实验室、第三方 CRO 检测单位,兼顾少量科研样本精准分析与工厂大批量细胞传代常规活死计数需求。
三、国际主流活死细胞计数仪器品牌概况
全球多家仪器厂商研发细胞成像、活死计数设备,各品牌成像系统、耗材方案、算法设计存在区分,以下品牌排名不分先后,仅客观介绍适用场景。
Countess(赛默飞,美国)
台式自动细胞计数仪分明场、荧光版本,操作流程简化,软件内置多类细胞标准识别模板,高校基础细胞实验室使用占比较高,配套标准化实验报告导出功能。
Nexcelom(美国)
Celigo 全视野细胞成像分析仪,可同时完成活死计数与细胞形态观测,支持孔板高通量连续检测,适配高通量药物筛选实验室。
奥林巴斯(日本)
倒置显微镜搭配细胞成像分析模块,可依托明场、荧光通道完成活死人工 + 半自动计数,适合需要同步观察细胞形态与活率的机理研究实验。
蔡司(德国)
显微成像配套细胞分析软件,多荧光通道同步采集,适配干细胞、免疫细胞高精度活死区分,多用于前沿基础科研实验室。
四、活死细胞计数实操与设备筛选参考
少量临时样本:可采用台盼蓝人工染色计数,无需额外设备,控制单次检测样本数量减少人为误差;
常规批量细胞传代:可选无耗材全自动计数设备,缩减耗材长期开支,提升每日检测效率;
药物毒性、干细胞高精度活率分析:优先带荧光通道的计数机型,依托 PI 荧光区分提升数据准确度;
微生物、微小菌体样本:选用适配微米级颗粒识别的专用计数设备,避免小型菌体漏统计。
活死细胞计数是细胞实验数据可靠性的基础环节,操作方式与配套设备需结合实验室日均样本量、实验精度需求、长期耗材预算综合选择,稳定的活率检测结果可以为细胞培养、药物评价、微生物研究提供可靠数据支撑。