吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/24样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,分为( Glu) 和( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以为前体合成途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。
测定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。
需自备的仪器和用品:
可见外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体60 mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体6 mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体6 mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加入25 mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周;
试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加入25 mL蒸馏水,溶解后4℃保存一周;
试剂六:液体25mL×1瓶,室温保存;
试剂七:10mmol/L标准磷贮备液10mL×1瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂七 20倍稀释,即取 0.1mL试剂七加1.9mL蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制:按H2O: 试剂四:试剂五:试剂六=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注意:配试剂 用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
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