半(Cys)含量测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/96S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
蛋白质含有三种含硫氨基酸:、和Cys。其中,Cys是 一种含有巯基的含硫氨基酸,从转化而来,并且可与互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成,经常是蛋白质活性中心的组成部分,还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外,Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面,在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性,并且补充巯基,以维持皮肤的正常代谢,调节表皮下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白。
测定原理:
Cys还原磷钨酸生成钨蓝,在600nm处有吸收峰;通过600nm吸光度,计算Cys含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、85%磷酸和蒸馏水。
半提取:
1、液体样品中半提取:取0.1mL液体样品,加试剂一0.9mL,充分混匀,8000g
4℃离心10min,取上清液,待测。
2、组织中半提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10 min,取上清液待测。
3、或培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
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