吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,分为( Glu) 和( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以为前体合成途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。
测定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
或培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
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